QPCR(实时定量聚合酶链反应)中的荧光染料主要有以下几种:
1. SYBR Green I:这是一种广泛应用于QPCR的荧光染料,能够在扩增过程中嵌入到DNA双链中,并在荧光检测器下发出荧光。SYBR Green I对双链DNA的结合具有非特异性,因此可以检测到PCR反应中产生的所有双链DNA。
2. ROX:ROX(Roxettabolide X)是一种内参染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间的荧光信号误差。它与SYBR Green I一起使用,可以提高QPCR检测的准确性。
3. TaqMan探针:TaqMan探针是一种特异性荧光探针,它们与目标序列互补,只在特定目标序列扩增时发出荧光。TaqMan探针具有高度特异性,可以减少非特异性扩增产物的产生。
4. FAM:FAM(Fluorescein Adenosine Monophosphate)是一种荧光染料,常用于标记QPCR引物或探针。它在扩增过程中与DNA结合并发出荧光。
5. JOE:JOE(Junction Fluorescent Protein)是一种橙色荧光染料,也常用于QPCR实验中。它的荧光强度比SYBR Green I强,因此在较低的荧光背景下,可以提高检测灵敏度。